關(guān)鍵詞 |
高純度辣根過氧化物酶,湖北辣根過氧化物酶,試劑級辣根過氧化物酶,試劑級辣根過氧化物酶 |
面向地區(qū) |
全國 |
重金屬 |
0.0003 |
砷含量 |
0.0002% |
酶活力 |
10萬 |
酶活力保存率 |
98% |
有效物質(zhì)含量 |
99% |
級別 |
試驗試劑LR |
辣根過氧化物酶(HRP)標記抗體的原理主要基于化學反應使 HRP 與抗體結(jié)合形成復合物。
通常使用一些化學交聯(lián)劑,如戊二醛等,來連接 HRP 和抗體。這些交聯(lián)劑能夠與 HRP 和抗體上的氨基等官能團發(fā)生反應,形成共價鍵,從而將 HRP 穩(wěn)定地標記在抗體上。
標記后的抗體仍保留其與相應抗原結(jié)合的特異性和親和力,同時由于結(jié)合了具有催化活性的 HRP,在后續(xù)的檢測實驗中,加入相應的底物,HRP 可以催化底物發(fā)生顯色反應,從而指示抗體與抗原的結(jié)合情況,實現(xiàn)對目標物質(zhì)的檢測和分析。
辣根過氧化物酶的提取方法通常包括以下步驟:
1. 材料準備:選取新鮮、無病害的辣根作為原材料。
2. 粉碎處理:將辣根洗凈、去皮,切成小塊,然后使用勻漿機或研磨器將其粉碎成勻漿。
3. 提取液制備:配置適當?shù)奶崛【彌_液,常見的提取緩沖液成分包括磷酸鹽緩沖液、Tris-HCl 緩沖液等,并可能包含一些穩(wěn)定劑和保護劑,如蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等。
4. 提?。簩⒎鬯榈睦备c提取緩沖液混合,在適當?shù)臏囟龋ㄈ?4°C)下攪拌或振蕩一段時間,以充分提取酶。
5. 離心分離:將提取混合物進行離心,通常在低溫下(如 4°C)以較高的轉(zhuǎn)速離心,使固液分離。
6. 收集上清液:離心后,收集上清液,其中含有辣根過氧化物酶。
7. 純化(可選):如果需要更高純度的酶,可以采用層析法(如離子交換層析、凝膠過濾層析等)進一步純化。
需要注意的是,具體的提取條件和步驟可能會因?qū)嶒炓蠛蛯嶒炇覘l件的不同而有所差異。在進行提取實驗時,應根據(jù)實際情況進行優(yōu)化和調(diào)整。
辣根過氧化物酶(HRP)具有多種用途,包括但不限于以下方面:
1. 測定:廣泛應用于酶聯(lián)吸附測定(ELISA)等分析技術(shù)中,用于檢測抗原或抗體。
2. 組織化學染色:用于檢測組織切片中的特定成分,例如細胞內(nèi)的某些酶或蛋白質(zhì)。
3. 蛋白質(zhì)印跡(Western blotting):在蛋白質(zhì)檢測和分析中發(fā)揮重要作用。
4. 生物傳感器:用于構(gòu)建檢測各種生物分子的傳感器。
5. 醫(yī)學診斷:幫助診斷某些疾病,如檢測特定的生物標志物。
總之,辣根過氧化物酶在生物化學、學、醫(yī)學等領(lǐng)域中是一種非常重要且常用的工具酶。
辣根過氧化物酶(HRP)常用于測定、酶聯(lián)吸附試驗(ELISA)等生物技術(shù)實驗中。以下是一般的使用方法:
1. 儲存:辣根過氧化物酶通常需要在低溫(如 -20°C 或 -80°C)下儲存,以保持其活性。在使用前將其置于冰上解凍。
2. 稀釋:根據(jù)實驗要求,將 HRP 用適當?shù)木彌_液進行稀釋。常用的緩沖液包括磷酸鹽緩沖液(PBS)、Tris-HCl 緩沖液等。稀釋比例需要根據(jù)具體實驗和酶的濃度來確定。
3. 標記:在某些實驗中,HRP 用于標記抗體或其他生物分子。標記過程需要特定的化學方法和條件,以確保標記的效率和穩(wěn)定性。
4. 反應:將含有 HRP 的樣品與底物溶液混合,啟動酶促反應。常用的底物包括鄰苯二胺(OPD)、3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)等。
5. 檢測:在適當?shù)臈l件下(如溫度、時間)孵育反應混合物,然后通過分光光度計或其他檢測設備測量反應產(chǎn)物的吸光度或發(fā)光強度,以定量或定性分析樣品中的目標物質(zhì)。
需要注意的是,具體的使用方法可能因?qū)嶒災康?、樣品類型和檢測方法的不同而有所差異。在進行實驗前,應仔細閱讀相關(guān)的實驗手冊和產(chǎn)品說明書,以確保正確使用辣根過氧化物酶并獲得準確可靠的實驗結(jié)果。
辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)是一種廣泛應用于生物技術(shù)和生物化學領(lǐng)域的酶。
其化學性質(zhì)包括:
1. 催化作用:能夠催化過氧化氫(H?O?)參與的氧化還原反應。
2. 底物特異性:對多種有機底物具有催化氧化作用,例如芳香族胺類和酚類化合物。
3. 穩(wěn)定性:在一定條件下具有較好的穩(wěn)定性,但易受溫度、pH 值、化學試劑等因素的影響。
4. 光學性質(zhì):其催化反應通常會產(chǎn)生具有特定顏色或吸光度變化的產(chǎn)物,可用于定量檢測。
5. 活性調(diào)節(jié):活性受多種因素調(diào)節(jié),包括底物濃度、pH 值、溫度和抑制劑等。
這些化學性質(zhì)使得辣根過氧化物酶在測定、酶聯(lián)吸附測定(ELISA)、生物傳感器等方面得到了廣泛應用。
辣根過氧化物酶呈棕褐色粉末狀。 辣根過氧化物酶用途廣泛,常見用途包括: 1. 組化和印跡實驗:用于檢測特定蛋白質(zhì)的存在和分布。 2. 酶聯(lián)吸附測定(ELISA):作為標記酶,用于檢測抗體或抗原。 3. 生物傳感器:用于構(gòu)建檢測各種生物分子或化學物質(zhì)的傳感器。 它的催化活性和穩(wěn)定性使其在生物技術(shù)和生物醫(yī)學研究中發(fā)揮著重要作用。
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