炭疽芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
PCR檢測試劑盒有效期一般為1年,這是指在適當(dāng)?shù)膬Υ鏈囟认?。核酸擴(kuò)增部分的試劑一般要貯存于-20℃下,產(chǎn)物檢測部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。上海
【結(jié)果分析條件設(shè)定】
u 基線(Baseline)設(shè)定:應(yīng)選擇該次實驗指數(shù)擴(kuò)增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(End)應(yīng)比早出現(xiàn)指數(shù)擴(kuò)增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán),建議基線設(shè)為6~15。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾值線設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲線的高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
1. 陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陰性,無指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無Ct;
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性,有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,Ct值應(yīng)小于等于35;
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。
【結(jié)果判斷】
1. 陽性:有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,且Ct<38;
2.可疑:有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復(fù)核一次,若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;
3. 陰性:無指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
?、跿aq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
?、馨谢虻奶禺愋耘c保守性。
炭疽芽孢桿菌其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 探針法熒光定量PCR靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4)對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人激肽釋放酶10(KLK 10)ELISA
小鼠芳香酶試劑盒 Mouse Aromatase,ARO ELISA Kit
血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)PCR檢測試劑盒 , SAA4 ELISA Kit
MouseCoisolPCR檢測試劑盒小鼠皮質(zhì)醇(Coisol)PCR檢測試劑盒
ELISAKitPAL小鼠L苯酸解酶規(guī)格:48T/96T
ChickenPlateletFactor4,PF-4ELISAKit雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)PCR檢測試劑盒
Anti-APP695/770 /FITC 熒光素標(biāo)記淀粉樣肽前體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-FLIP S/L /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Collagen II/Chondrocalcin Ⅱ型膠原α1蛋白/骨鈣素抗體 規(guī)格 0.1ml
SSA/RO (ribonucleoprotein complex,RNP) 核糖核蛋白抗原RO/SSA(抗原) 0.5mg
phospho-JunD(Ser255) 英文名稱: 0酸化活化蛋白激酶D抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh TSSK6/CT72 特異絲酸/蘇酸激酶6抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-FLIP S/L /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
炭疽芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒Anti-VEGFR1/VEGF-R1/Flt-1 /FITC 熒光素標(biāo)記血管內(nèi)皮生長因子受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CDK5(Cyclin Dependent Kinase 5) 周期素依賴性激酶5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體(人) Anti-CD46/MCP/membrane cofactor protein 0.1ml
phospho-SHC (Ser36) 英文名稱: 0酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
phospho-ERK1/2 (Thr202 + Tyr204) 英文名稱: 0酸化原活化蛋白激酶1/2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-GluR1(Ser849) 0酸化谷酸受體1抗體 規(guī)格 0.1ml
CDK5(Cyclin Dependent Kinase 5) 周期素依賴性激酶5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
PCR檢測步驟:
1、樣品處理
1)按照GB 4789.10-2016(或SN/T 1870-2016),取樣品25g(mL),加入到含有225mL 7.5% NaCl肉湯的無菌容器中均質(zhì),調(diào)節(jié)pH至6.8±0.2。
2)36±1℃培養(yǎng)18-24h。
注:也可參考其他地方標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行樣品的前處理。
2、核酸提取
1)取40μL增菌液于裂解液管中,98℃或沸水浴10min。
2)冷卻至室溫,吸取上清備用或者置于-20℃保存。
3、反應(yīng)體系配置
從試劑盒中取出SA預(yù)混液,充分融化,短暫離心,然后將陰性對照、樣品的DNA提取液、陽性對照各取5μL分別加入PCR管中,蓋好管蓋,短暫離心,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4、PCR擴(kuò)增
PCR管置于PCR儀上,推薦反應(yīng)程序設(shè)定如下:反應(yīng)體系為25μL,在第二步每個循環(huán)60℃時檢測熒光信號,檢測通道選擇FAM。
陰溝腸桿菌分離瓊脂(ECIA)
3200元
產(chǎn)品名:陰溝腸桿菌分離瓊脂,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯生化管
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產(chǎn)品名:乙酰胺肉湯生化管,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯
3200元
產(chǎn)品名:乙酰胺肉湯,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯
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產(chǎn)品名:胰酪胨大豆多粘菌素,培養(yǎng)基
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產(chǎn)品名:胰酪大豆胨液體,培養(yǎng)基
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3200元
產(chǎn)品名:胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基,培養(yǎng)基
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3200元
產(chǎn)品名:胰酪胨大豆羊血,培養(yǎng)基