考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量試劑盒可見分光光度法說(shuō)明書

可見分光光度法 50管/48樣 

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

產(chǎn)品名稱：考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量試劑盒可見分光光度法

貨號(hào)：LZ-S01370-A

規(guī)格 : 50管/48樣

測(cè)試方法:可見分光光度法

產(chǎn)品分類：蛋白含量測(cè)定系列

發(fā)貨地：上海

測(cè)定意義：

樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計(jì)算。此外，可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分

析。

測(cè)定原理：

在酸性溶液中，考馬斯亮藍(lán) G-250 與蛋白質(zhì)結(jié)合形成藍(lán)色復(fù)合物；該復(fù)合物在 620nm 處有大吸收峰， 其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比。該方法靈敏度高，適合微量蛋白質(zhì)分析。

自備儀器和用品：

離心機(jī)、分光光度計(jì)、石英比色皿、移液器和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

試劑一：液體 30 mL×1 瓶，4℃保存。

樣品中可溶性蛋白質(zhì)提?。?/span>

1. 液體樣品：澄清液體樣品可以直接測(cè)定。

2. 組織樣品：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：20 的比例（建議稱取約 0.05 g 組織，加入 1mL 提取液（自備，根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水））冰浴勻漿，8000g，4℃離心 10min，取上清，即待測(cè)液。（動(dòng)物樣品常常需要稀釋）

3. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7秒，總時(shí)間 3min）；然后 8000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測(cè)。

操作步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

生化檢測(cè)試劑盒常見問(wèn)題：

在使用生化檢測(cè)試劑盒時(shí)，可能會(huì)遇到一系列常見問(wèn)題，這些問(wèn)題主要涉及到試劑盒的使用、保存、有效期、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面。以下是一些常見的問(wèn)題及其解決方法：

一、?測(cè)定原理?：生化試劑盒通過(guò)化學(xué)反應(yīng)或酶促反應(yīng)測(cè)定樣本中物質(zhì)的含量或酶活性。常用的儀器包括分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀，它們的測(cè)定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水質(zhì)、動(dòng)植物組織、血清、細(xì)胞細(xì)菌、食品等樣本均可進(jìn)行測(cè)定?。

?二、選擇不同規(guī)格的試劑盒?：根據(jù)實(shí)驗(yàn)的實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。如果實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀且具備檢測(cè)波長(zhǎng)，可以選擇微量法試劑盒；如果有分光光度計(jì)及相應(yīng)規(guī)格的比色皿，則可以選擇常量法或微量法試劑盒。建議購(gòu)買前仔細(xì)閱讀說(shuō)明書，確認(rèn)自備的儀器和試劑是否符合要求?。

?三、保存方法?：收到試劑盒后，如果暫時(shí)不用，應(yīng)按照外包裝上指示的溫度保存。拆開包裝后，應(yīng)按照每個(gè)試劑的保存溫度進(jìn)行保存，注意有些試劑忌反復(fù)凍融，有些粉劑溶解后性質(zhì)不穩(wěn)定?。

四、?有效期?：一般生化試劑盒的有效期為6個(gè)月，也有特殊貨號(hào)的有效期為1年。具體以實(shí)際收到貨物的標(biāo)簽信息為準(zhǔn)?1。

?五、樣本處理?：新鮮樣本和冷凍樣本都可用于大多數(shù)指標(biāo)的測(cè)定，但有些生理活性物質(zhì)容易降解，建議使用新鮮樣本測(cè)定。對(duì)于冷凍樣本，建議在-70℃或液氮中保存。樣本在不同溫度下的保存時(shí)間有所不同，例如4℃可保存一周，-20℃保存一個(gè)月，-80℃保存3個(gè)月?。

?六、土壤酶活性測(cè)定?：對(duì)于土壤酶活性的測(cè)定，建議將鮮土風(fēng)干并過(guò)篩后取樣，以測(cè)定的重復(fù)性。若使用鮮土測(cè)定，需樣本的顆粒大小一致且水分含量相似?。

七、?預(yù)測(cè)定?：在進(jìn)行正式測(cè)定前，建議選擇2-3個(gè)預(yù)期結(jié)果差別較大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。通過(guò)預(yù)測(cè)定可以全面反映樣品特點(diǎn)、試劑質(zhì)量、儀器設(shè)備穩(wěn)定性和操作規(guī)范性，確保正式測(cè)定結(jié)果真實(shí)可靠?。

公司正在出售的產(chǎn)品：

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IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II 0.5mgIGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 樣生長(zhǎng)因子-II(抗原)

MMP8重組人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein

CMPK1 Protein Human 重組人 CMPK1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PRL Protein Mouse 重組小鼠 PRL / Prolactin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量試劑盒可見分光光度法小鼠甘油-3-0酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)ELISA試劑盒 ，英文名： GAPDH/G3PDH ELISA Kit

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