脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）試劑盒紫外分光光度法說明書
紫外分光光度法 50管/48樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
商品屬性：
產(chǎn)品名稱：脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）試劑盒紫外分光光度法
貨號：LZ-S0144-A
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法:紫外分光光度法
產(chǎn)品分類：維生素C代謝系列
發(fā)貨地：上海
測定意義:
DHAR存在于線粒體、細胞質(zhì)和葉綠體中。DHAR催化GSH還原DHA生成AsA，調(diào)控細胞AsA/DHA比值，是抗壞血酸-谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶。提高植物體內(nèi)的 DHAR 活性，可提高植物食品中AsA含量，進而提高植物食品的營養(yǎng)品質(zhì)。
測定原理:
DHAR催化GSH還原DHA生成AsA，通過測定DHA被還原量可計算得DHAR活性。
實驗中所需儀器及設(shè)備
研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計、1ml石英比色皿、可調(diào)式移液器、雙蒸水。
試劑的組成和配制:
試劑一：液體 50 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 35 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1 瓶（棕色），4℃保存。臨用前加入 5mL 蒸餾水充分溶解。
試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 5mL 蒸餾水充分溶解。
粗酶液提?。?/span>
1. 按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入
1mL 試劑一）進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心 10min，取上清置冰上待測。
2. 細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（10
4個）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議
500 萬細胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，
總時間 3min）；8000g 4℃離心 20min，取上清液置冰上混勻待測。
3. 血清等液體：直接測定
生化檢測試劑盒操作步驟：
一、?準(zhǔn)備工具和環(huán)境?：確保操作臺面干凈、整潔，這是進行科學(xué)實驗的步。天津
?二、?仔細閱讀說明書?：這是使用試劑盒的基礎(chǔ)，說明書包含了所有必要的信息和操作指南。
三、樣本采集?：按照說明書的指導(dǎo)，正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本，如血液、唾液或鼻涕等。
?四、樣本混合?：將樣本與試劑小心混合，注意輕柔操作，避免產(chǎn)生泡沫，以確保檢測的準(zhǔn)確性。
?五、?等待反應(yīng)?：混合后，耐心等待試劑盒的反應(yīng)，這個時間可以用來進行其他活動，但不要著急，因為好的結(jié)果值得等待。
六、結(jié)果判讀?：時間到后，仔細判讀結(jié)果。試劑盒通常會有明確的指示，告訴你如何根據(jù)顯示的線條或顏色來判斷結(jié)果。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。
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