產品介紹:
產品名稱:佩蘭LAMP鑒定試劑盒
英文名稱:Herba eupatorii
產品貨號:LZ-P3046
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光。
佩蘭LAMP鑒定有效期:一年
如何進行 PCR 實驗?
一、準備實驗材料(1)DNA模板:包含你想要復制的DNA區(qū)域。(2)引物:短的單鏈DNA片段,用于指導DNA合成的起始位置。(3)DNA聚合酶:一種酶,用于合成DNA。(4)四種脫氧核苷酸(dNTPs):DNA的構建塊。(5)緩沖液:提供適宜的反應環(huán)境。(6)鎂離子或其它必需的離子:通常作為DNA聚合酶的輔助因子。上海 二、設定反應混合物將所有材料混合在微量離心管中?;旌衔锏目傮w積通常在20-50微升之間。
3. PCR程序(1)將混合物放入PCR機(熱循環(huán)儀)中,并設定程序。PCR程序通常包括以下階段:(2)初次變性:加熱至94-98°C,持續(xù)幾分鐘,使DNA雙鏈解開成單鏈。(3)循環(huán)步驟(通常進行30-40次循環(huán)):(4)變性階段:加熱至94-98°C,持續(xù)20-30秒,使DNA雙鏈解開。(5)退火階段:降溫至50-65°C,持續(xù)20-40秒,允許引物與模板DNA結合。(6)延伸階段:加熱至72°C,持續(xù)1分鐘每1千個堿基,以便DNA聚合酶合成新的DNA鏈。(7)后延伸:在72°C下持續(xù)5-10分鐘,確保所有可用的DNA模板都被復制。(8)保持階段:將溫度降至4-15°C,直到用戶準備取出樣品。
實驗步驟:
一.樣品制備
1.佩蘭LAMP試劑盒PCR擴增并檢測。根據不同的引物挑選適合的退火溫度進行PCR擴增。擴增產物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測,上樣量3-5ul。PCR產物為10ng/nl左右為佳。
2.PCR產物與變性buffer混合。在干凈的PCR管底部加入5ul SSCP上樣緩沖液(變性緩沖液,同《分子克隆》中的測序緩沖液),然后在緩沖液中央加入PCR擴增產物。按照經驗,擴增效果在瓊脂糖膠上能看出比較亮的帶的樣品加1ul,效果很好加0.5ul,如果不太好就適當增加1.5、2或3不等,同時加大上樣緩沖液的量,比如加3ul的PCR產物,緩沖液加到8ul變性效果更好。
3.PCR產物變性。加好的樣品進行離心,使樣品集中在管底。PCR儀上95℃變性10分鐘,立即取出PCR產物連同架子一同置于冰上靜置5min,以免變性的產物復性。
小鼠顆粒酶A(GZMA)PCR檢測試劑盒 , GZMA ELISA Kit
人芳香烴受體(AhR)ELISA檢測試劑盒Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit
大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 Rat Serum amyloid A,SAA ELISA Kit
英文名稱RatLPSELISAKit大鼠脂多糖(LPS)
高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次
ELISAKitfPSA人游離前列腺特異性抗原規(guī)格:48T/96T
豚鼠膽堿脂酶(CHE)PCR檢測試劑盒 , CHE ELISA Kit
Human dopamine beta hydroxylase (DBH) ELISA Kit 人多巴胺-β羥化酶(DBH)PCR檢測試劑盒
RabbitEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 兔子內皮型合成酶3(eNOS-3)PCR檢測試劑盒
CLIAKitforBeta-OHB(HumanBeta-HydroxybyricAcid)ELISAKit人β規(guī)格:48T/96T
細菌銅型亞鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒20次
rabbitInsulin,INSELISAKit兔子(INS)PCR檢測試劑盒
佩蘭LAMP鑒定試劑盒GDNF 小鼠神經膠質細胞系衍化神經營養(yǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-FGF5 纖維母細胞生長因子5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml
Alpha-SYN(Human Alpha-Synuclein) ELISA Kit 人α突觸核蛋白 96T
SAM68 英文名稱: SRC有絲分裂相關蛋白68抗體 0.1ml
TMEM12 英文名稱: 跨膜蛋白12抗體 0.2ml
Anti-FGF5 纖維母細胞生長因子5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
PCR實驗的基本步驟:
佩蘭LAMP試劑盒PCR檢測試劑盒DNA聚合酶是實驗室中常用的生物學酶之一,在PCR實驗中具有重要的作用。實驗室常用的DNA聚合酶,包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。
一、Taq聚合酶:
Taq聚合酶是由Thermus aquaticus細菌產生的一種DNA聚合酶,在分子生物學研究中得到廣泛應用。Taq聚合酶具有熱穩(wěn)定性,可以在高溫條件下保持活性,這是由于其來源于熱液生物,能夠存活和正常活動于高溫環(huán)境。這使得Taq聚合酶在聚合酶鏈式反應(PCR)中起到關鍵的作用。Taq聚合酶能夠按照DNA模板合成新的DNA鏈,因此在PCR中用于擴增目標DNA片段。然而,Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性,導致其生成的PCR產物末端容易出現額外的腺嘌呤堿基。因此,在某些應用中,需要使用具有外切酶活性的聚合酶。
二、Pfu聚合酶:
PCR法Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus細菌產生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶相比,Pfu聚合酶具有更高的熱穩(wěn)定性和耐酶性。這使得Pfu聚合酶在高溫PCR反應中表現出色,其高度穩(wěn)定的酶活性能夠確保PCR反應的可靠性和準確性。此外,Pfu聚合酶還具有3'-5'外切酶活性,可以修復并糾正PCR反應中的腺嘌呤堿基誤配,有效防止誤差累積。因此,Pfu聚合酶適用于需要高度準確的PCR擴增和DNA測序。
三、Tth聚合酶:
PCR檢測試劑盒Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8細菌產生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同,Tth聚合酶具有熱活性反轉轉錄酶活性,可以將RNA模板合成相應的DNA鏈。因此,Tth聚合酶在逆轉錄PCR(RT-PCR)中得到廣泛應用,用于將RNA轉錄成DNA,并通過增加熱活性酶來實現PCR擴增。此外,Tth聚合酶還具有一定的外切酶活性,可用于修復和校正PCR產物的末端。
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