人脾外周血單個核細胞
基本屬性:
細胞名稱:人脾外周血單個核細胞
組織來源:外周血
商品貨號:LZ-YX9917
種屬來源:人
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介:
人外周血單個核細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異,因此得以分離出不同的細胞。
培養(yǎng)基:含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:半貼半懸浮
細胞形態(tài):圓形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
使用方法:
人脾外周血單個核細胞是一種半貼半懸浮細胞,細胞形態(tài)呈圓形,在技術部標準操作流程下,細胞不增殖;不傳代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗??蛻羰盏郊毎螅埌凑找韵路椒ㄟM行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
人脾外周血單個核價格3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
人脾外周血單個核型號3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml完全培養(yǎng)基(補加1%FBS,促進貼壁)重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);
4)待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基(37℃預熱)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒 ,英文名: GSH-Px ELISA Kit
大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA檢測試劑盒RatiactParathormone,i-PTHELISAKit 96T/48T
人白細胞抗原DR(HLA-DR)試劑盒 Human Leukocyte Aigen-DR,HLA-DR ELISA Kit
Reatserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit大鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
P21蛋白共沉淀分析試劑盒5次
PorcineIerleukin6,IL-6ELISA試劑盒豬白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠生長抑素(SS)ELISA試劑盒 ,英文名: SS ELISA Kit
小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA檢測試劑盒MouseEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit 96T/48T
人高分子量脂聯(lián)素(HMW Adnectin)試劑盒 Human High Molecular Weight Adnectin,HMW Adnectin ELISA Kit
Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISAKit大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
BJ5183-AD-1鈣轉感受態(tài)細菌1X100微升
MouseIerferonα,IFN-αELISA試劑盒小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SLPI重組人 SLPI 蛋白 (His 標簽) Protein
SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain 0.5mgSM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽
EPCAM重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (His 標簽) Protein
CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)
NRP1 Protein Human 重組人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 標簽)
人脾外周血單個核細胞SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain 0.5mgSM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽
CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)
SLPI重組人 SLPI 蛋白 (His 標簽) Protein
NRP1 Protein Human 重組人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 標簽)
EPCAM重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (His 標簽) Protein
原代細胞試用的實驗類型:
上海前面我們了解了原代細胞獲取和培養(yǎng)過程中應該注意的一些細節(jié),這有助于我們培養(yǎng)我們的原代細胞。那么原代細胞培養(yǎng)好后,它可適用哪些研究呢?
原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。在這些應用中幾乎都涉及了幾個常見的且基礎的細胞實驗,如下:
一、細胞增殖檢測:
常見檢測方法:CCK8檢測法 ,MTT檢測法,Brdu檢測法,Edu檢測法,平板克隆形成
二、細胞周期檢測
常見檢測方法:流式檢測細胞周期,標記有絲分裂百分率法
三、細胞凋亡檢測
常見檢測方法:流式檢測細胞凋亡,線粒體膜電位,活性氧檢測,Hoechst染色,電鏡,TUNEL
四、細胞轉移能力檢測
常見檢測方法:細胞劃痕實驗,Transwell實驗,Invasion實驗